| 产地 | 上海 |
|---|---|
| 品牌 | 雅吉生物 |
| 货号 | t0058 |
| 用途 | 扩增培养实验 |
| 包装规格 | 0.5质粒干粉 |
| 是否进口 | 否 |
Origami B(DE3)大肠表达菌质粒载体使用说明书
如需该质粒图谱可以联系客服索取，更多质粒请联系我们
亲爱的科研工作者，感谢您信任雅吉生物，我们致力于为大家分享质优价适的质粒，受各种因素影响，我们只保证质粒的关键序列测序正确，不能保证实验效果。请您收到质粒后请务必先转化，再挑取单菌落扩增，不要直接使用。如果您需要即用的大包装质粒或病毒颗粒，可委托我们制备，性价比更高。
一、扩增流程
收到产品后，请先根据产品管壁标签来判断产品形式，并在扩增前准确查找该质粒菌株的抗性、感受态和培养温度。
1、质粒干粉
产品规格：0.5～2μg质粒干粉，保证能转化出来，不保证具体含量，请务必先转化进感受态，再挑单菌落提取后再使用。
保质期限：90天，请尽快转化。
保存温度：一般在-20°C，置于-80°C保存时间更长。
运输方式：常温运输，1周内。
注意事项：转化前请准确查找该质粒相应的抗性、抗性浓度、感受态名称和培养温度。
使用说明：
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
2、从-80°C冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min;
4、42℃热激90s，再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min，仅留100μl上清混匀菌体沉淀；
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h～16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
注意：如果平板长的过多，请将质粒稀释后再转化；如果没有长菌落，请取10μl质粒转化。
Origami B(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
2、甘油菌种（冰袋运输，存于-80℃，保质期90天，请务必划线挑单克隆培养）
产品规格：甘油菌种。
保质期限：90天，请尽快划线培养。
保存温度：-80℃。
运输方式：冰袋运输，1周内。
注意事项：培养前请准确查找该菌种的抗性、抗性浓度和培养温度。
使用说明：
1、收到甘油菌种后请甩动保存管，让菌液不要吸附在管壁上；
2、用接种环在固体平板上四区划线，如有抗性就加对应抗性；
3、恒温培养箱倒置培养12~16h；
4、挑取单菌落接种于液体培养基中，如有抗性就加对应抗性；
5、摇床震荡培养12~16h，根据实验需要保存甘油菌，酵母加30% 甘油，其它一般加15%甘油。
注意：务必要四区划线挑单菌落培养。
Origami B(DE3)大肠表达菌质粒载体
常用抗生素推荐浓度：
附表一：
|
简称 |
中文名称 |
溶剂 |
储存浓度 |
大肠工作浓度 |
备注 |
|
Amp |
氨苄青霉素 |
ddH2O |
100mg/ml |
100μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Car |
羧苄青霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Kan |
卡那霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Spe |
壮观霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Gen |
庆大霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Apr |
安普霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Zeo |
博来霉素 |
ddH2O |
100mg/ml |
100μg/ml |
0.22 μm过滤除菌，低盐高PH的培养基 |
|
Blast |
杀稻瘟菌素 |
ddH2O |
10mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌，低盐高PH的培养基 |
|
Hyg |
潮霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Chl |
氯霉素 |
无水乙醇 |
50mg/ml |
50μg/ml |
松弛型质粒可以提高到170μg/ml |
|
Str |
链霉素 |
ddH2O |
50mg/ml |
50μg/ml |
0.22 μm过滤除菌 |
|
Tet |
四环素 |
无水乙醇 |
10mg/ml |
10μg/ml |
培养基不能含镁离子 |
|
Rif |
利福平 |
DMSO |
50mg/ml |
50μg/ml |
一般用于农杆菌 |
|
Erm |
红霉素 |
无水乙醇 |
200mg/ml |
600μg/ml |
大肠杆菌对红霉素不敏感 |
t0061
Origami2(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0060
Rosetta-gami-B(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0059
Origami B(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
t0058
Origami B(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0057
BL21 Star(DE3)大肠表达菌质粒载体
Origami B(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
t0054
C43(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
t0053
C43(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0052
C41(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
t0051
C41(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0050
TB1大肠表达菌质粒载体
t0049
AD494(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0048
BL21Gold (DE3) pLysS大肠表达菌质粒载体
t0047
BL21trxB(DE3)大肠表达菌质粒载体
t0046
BL21-AI大肠表达菌质粒载体
t0045
BL21 CodonPlus (DE3)-RIPL大肠表达菌质粒载体
t0044
BL21 CodonPlus (DE3)大肠表达菌质粒载体
t0043
BL21(DE3)pLysS大肠表达菌质粒载体
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