| 产地 | 中国 |
|---|---|
| 保存条件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 中国 |
| 货号 | YS03012B |
| 用途 | 科研实验使用 |
| 检测方法 | Elisa法 |
| 保质期 | 六个月 |
| 适应物种 | 小鼠 |
| 检测限 | 1pg/L |
| 数量 | 99 |
| 包装规格 | 96T |
| 标记物 | 无 |
| 样本 | 血清、血浆及相关液体样本 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 是 |
小鼠端粒酶(TE)Elisa试剂盒特点：
1. 安全、快速、重复性好；
2. 特异性 ，灵敏度超过90%；
3，有48T/96T规格，现货供应，提供免费代测服务；
小鼠端粒酶(TE)Elisa试剂盒组织样本一般制成组织匀浆，处理方法如下：
1.使用干净的工具解剖目标组织，尽快置于冰上，以防被蛋白酶降解。（暂时不处理的组织，置于圆底微量离心管中，浸入液氮中“速冻”，在 -80℃ 下存储样品备用）
2.用预冷的 PBS 缓冲液（0.01M，pH=7.4）洗涤组织去除残留的血液，称重后备用。若组织块较大，需先剪碎。
3.在冰上用研磨缓冲液（常用 PBS 缓冲液，但 使用 50mM Tris+0.9%NaCL+0.1% SDS,PH 7.3。或者中等强度 RIPA 细胞裂解液，注意 RIPA 裂解液 PH 值需为 PH7.3，建议不要使用含 NP-40，Triton X-100 和高浓度 DTT 的组分，会抑制抗原抗体反应。）研磨组织匀浆（加入研磨缓冲液的体积取决于组织的重量。一般情况下，每 1 克组织碎片应使用 9ml 研磨缓冲液。另外建议在研磨缓冲液中加入一些蛋白酶抑制剂，如 1mM PMSF）。得到的匀浆液可再利用超声破碎或反复冻融进一步处理（超声破碎过程中，需冰浴降温；反复冻融法可重复 2次）。
4.将制备好的匀浆液于 5000×g 离心 5 分钟，留取上清即可检测。或分装冻存于-20℃或-80℃。
5.根据实验需要，组织匀浆样本可先定量总蛋白,以便于统计分析数据，一般调整总蛋白浓度至 1-3mg/ml。某些组织样本，如肝脏，胰腺因含有较高浓度的内源性过氧物酶, 在样品浓度较高的情况下会和试剂盒底物反应出现假阳性。
小鼠端粒酶(TE)Elisa试剂盒样本
1.细胞培养上清：
1）使用 96，24，6 孔板，（贴壁或悬浮）细胞密度达到 60-90%。
2）使用 6-10mm 培养皿，T25/T75 细胞培养瓶，（贴壁或悬浮）细胞密度达到 60-90%。
3）悬浮细胞：2-8℃，2500rpm 离心 5min，收集澄清的细胞培养上清。
4）贴壁细胞：直接收集上清液，2-8℃，2500rpm 离心 5min，收集澄清的细胞培养上清。
5）立即用于检测，或分装于-80℃冻存备用。
小鼠端粒酶(TE)Elisa试剂盒使用技巧
1.样本的准备：尽量使用新鲜样本，不使用有溶血，被细菌污染、标本保存时间过长和标本凝固不全的样本。ELISA检测宜采集新鲜标本，如不能立即测定，5天之内应4℃保存，对于1周后检测的样本应低温冻存；做好分装，长时间冻存的样本避免反复冻融。
2.仔细阅读说明书，熟悉整个流程，推荐画出简要步骤图；提前准备试剂，比如常见20X洗涤液是浓缩液，需要用超纯水提前稀释准备好。一般的检测抗体和酶标二抗需要用对应的稀释液稀释至工作浓度。
3.不同批次的试剂不要混用，检查各组分的有效期。
4.预包被的酶标板条和各试剂组份需要室温平衡30 min以上，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需温度，预防后续实验中由于孵育温度或是时间不够充分，而将一些弱阳性样本不能检出。
5.待测样本加样：待检样本过多时，建议分批操作；需要稀释的样本提前做好稀释，注意选对合适稀释液；控制好加样时间，避免加样费时过长造成误差；注意加样角度，垂直加入孔底，不要接触孔壁, 做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
6.温育和洗板：温育时间和温度一般根据试剂盒的说明书进行选择。温育时可以采用水浴或者湿盒孵育,避免“边缘效应”。①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅。
7.显色：市售ELISA 试剂盒中，一般是以四甲基联苯胺(TMB)为底物的显色液，反应条件为37℃或室温反应15～30 min。显色反应需要避光。
8.读数和数据分析：终止后读取结果尽量在15min内完成，读取OD值时酶标仪需先预热15～30 min再进行。数据分析一般用四参数和直线拟合法，选择哪种拟合方式，可以依据标曲的相关系数（R2）来确定，R2一般需要大于0.99。
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月更多产品详情联系我们
YS03010B 小鼠缺氧诱导因子(HIF-1)Elisa试剂盒
