| 产地 | 中国 |
|---|---|
| 保存条件 | 2-8℃ |
| 品牌 | 中国 |
| 货号 | YS03037B |
| 用途 | 科研实验使用 |
| 检测方法 | Elisa法 |
| 保质期 | 六个月 |
| 适应物种 | 小鼠 |
| 检测限 | 1pg/L |
| 数量 | 99 |
| 包装规格 | 96T |
| 标记物 | 无 |
| 样本 | 血清、血浆及相关液体样本 |
| 应用 | 科研实验 |
| 是否进口 | 是 |
小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)Elisa试剂盒：双抗体夹心 ELISA 法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体含量。
试剂盒的组成：
组成：
（1）结合物及标本的稀释液；
（2）洗涤液，在板式ELISA中，常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水；
（3）酶标记的抗原或抗体（结合物）；
（4）酶的底物；
（5）阴性对照品和阳性对照品（定性测定中），elisa试剂盒参考标准品和控制血清（定量测定中）；
（6）已包被抗原或抗体的固相载体（免疫吸附剂）
用途：科研与实验专用试剂，不得用于临床诊断。
检测种属：人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。
标本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)Elisa试剂盒储存方式
标本的采集与保存：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
◇液体类标本：
标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。
◇血清：
室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◇血浆：
应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入10％（v/v）抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◇尿液、胸腹水、脑脊液：
用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。
◇细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
◇组织标本：
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清置于-20度或-70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
4. 细胞裂解液：
1）贴壁细胞需要先用胰酶消化，离心收集细胞（悬浮细胞可直接离心收集）；2）将收集到的细胞用冷 PBS 洗 3 次；
3）物理方法裂解细胞（可先超声破碎细胞，再反复冻融）：
i 超声破碎：取适量 PBS 重悬细胞，用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂。
ii 反复冻融：将待破碎的细胞在-20℃ 以下冰冻，室温融解，反复 3 次，使细胞溶胀破碎。
4）将标本于 2-8℃ 1500×g 离心 10 分钟，收集上清备用。
5. 细胞培养上清或其它生物标本：请 1000×g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃ 或-80℃ 保存，但应避免反复冻融。
小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)Elisa试剂盒注意事项
1. 以上标本均需密封保存，4℃ 保存应小于 1 周，-20℃ 不应超过 1 个月，-80℃ 不应超过 2 个月。
2. 标本使用前应缓慢均衡至室温，不应加热使之融解。
3. 标本溶血会影响*后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。操作步骤
小鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)Elisa试剂盒操作步骤：
1.加样：分别设标准孔、待测样品孔、空白孔。设标准孔 7 孔，依次加入 100μL 不同浓度的标准品 （见试剂准备 2）。空白孔加 100μL（见试剂准备 步*后一管），余孔加待测样品 100μL，酶标板加上覆膜，37℃ 温育 2 小时。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。
3.每孔加检测溶液 A 工作液 100μL（临用前配制），酶标板加上覆膜，37℃ 温育 1 小时。
4.弃去孔内液体，每孔用 300μL 的洗涤液洗涤，浸泡 1-2 分钟，吸去 （不可触及板壁） 或甩掉酶标板内的液体，在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次 （也可轻拍将孔内液体拍干），重复洗板 3 次。*后一次洗涤后，要把孔内的洗涤液完全甩干。自动洗板机亦可。
5.每孔加检测溶液 B 工作液 （临用前配制）100μL，加上覆膜，37℃ 温育 1 小时。
6.弃去孔内液体，甩干，洗板 5 次，方法同步骤 4。
7.每孔加底物溶液 90μL，酶标板加上覆膜，37℃ 避光显色 （反应时间控制在 15-25 分钟，不要超过 30 分钟。当标准孔的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔梯度不明显时，即可终止）。
8.每孔加终止溶液 50μL，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物溶液的加入顺序相同。如出现颜色不匀一，请轻轻晃动酶标板以使溶液混合均匀。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后，立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 （O.D. 值）。
1．试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月更多产品详情联系我们
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