植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)

植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)植物组织或果实中存在花青素、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、酚类等物质，对其加工性能、存储、营养价值等都有重要影响，植物酚类物质具有抗氧化的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)检测原理是总酚(Total Phenol)溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提总酚，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长(280nm)处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出总酚含量，主要用于植物组织或果实中总酚的提取以及定量检测总酚含量。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

1、蒸馏水、无水乙醇

2、实验材料∶植物组织(芹菜、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等
3、研钵或匀浆器或粉碎机或超声破碎机
4、离心机、离心管
5、恒温水浴锅、恒温干燥箱
6、电子天平、30~50目筛
7、分光光度计、比色皿

植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品∶
①植物样品∶取新鲜植物样本，清洗干净，研钵研碎(粉碎)，干燥箱烘干后过筛，称取0.05g 样品，加入0.8ml氮自由基提取液，40℃水浴浸提30~60min，10000rpm离心10min，上清液待用，4℃保存备用(亦可参考相关资料提取方法提取)。
②血浆、血清和尿液样品︰血浆(用肝素或枸橼酸钠抗凝，不宜使用EDTA 抗凝)4°℃5000rpm离心10min，取上清液待用;血清或尿液样品可直接测定。
③细胞样品︰按每5×10°个细胞加入0.8ml氮自由基提取液，超声破碎(功率200W,超声3s，间隔10s，重复30次)，10000rpm 离心10min，取上清液待用。

④果汁、葡萄酒等样品︰按样品∶氮自由基提取液=1∶9的比例震荡混匀，10000rpm离心10min，上清液待用，4℃保存备用。

⑤高活性样品︰如果样品中有效浓度较高，可用提取液进行恰当的稀释。

2、配制维生素C溶液︰将一支10mg维生素C充分溶解于1ml氮自由基提取液中，即成10mg/ml维生素C溶液;可分成0.1ml的小份，-20℃保存。

3、配制Vc标准工作液︰如需测线性关系，建议用氮自由基提取液将10mg/ml维生素C溶液稀释至20、15、10、8、6、4、2μg/ml的Vc标准工作液;如需清除率约为 的阳性对照，建议选用大于 30μg/ml 的Vc标准工作液。

4、分光光度计开机预热 30min，调节波长517nm(500~530nm亦可)，无水乙醇调零。

5、DPPH加样∶按照下表设置空白管、样本测定管、样本对照管、阳性对照管，溶液应按照顺序依次加入，混匀，室温避光静置30min。

6、OD值测定∶将各管溶液依次加入到比色皿中，用分光光度计检测各管吸光度值，依次记为A₀、A₁、A₂、A₃。

植物总酚(TP)检测试剂盒(比色法)注意事项：

1、正式测定之前建议选择2~3个预期差异较大的样本做预实验。

2、实验材料应尽量新鲜，当天提取当天测定。

3、不同样本清除DPPH自由基的能力差异很大。

4、如样本DPPH清除率大于90%，应用提取液稀释；如样本 DPPH清除率小于5%，应提高样本用量以提高有效成分浓度。

5、样品中不宜添加Triton、DTT等可能影响氧化还原反应的成分。

6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。