产地 | 上海 |
---|---|
品牌 | 雅吉生物 |
货号 | A2801 |
用途 | 科研实验 |
包装规格 | 250U/1000U |
是否进口 | 否 |
本产品仅供科研,如需产品详细説明请联系客服
描述:其扩增灵敏度、产量更高、对复杂
模板的扩增能力更强。该产品配备的 10×HG PCR Buffer 1
为 Mg2+自调节反应缓冲液,使用该反应液可在宽范围内
Mg2+浓度下获得高特异性 PCR 扩增产物,同时该 Buffer 系
统可允许引物在宽范围温度内进行退火反应,降低非特异性
条带的扩增,从而减少 PCR 的优化次数。应用该酶扩增的
PCR 产物含有”A”尾巴,可直接连接入 pUC57 Simple TOPO
克隆载体。
组分
名称 250U 1000U
Super Taq DNA
Polymerase(5 U/μl)
50 μl 200 μl
10×HG PCR Buffer 1 1 ml 1 mlx4
活性定义:一个活力单位即在在 74°C 条件下,30 分钟内催
化 10 nmol dNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶
量。
应用:PCR 扩增、3’端加尾、DNA 测序。
储存:-20℃可保存 3 年。
PCR 反应性能:以 λDNA 为模板,扩增 15kb DNA 片段;
以人类基因组 DNA 为模板,扩增 8kb DNA 片段。
反应实例
1. 按以下组分配制 PCR 反应液
Super Taq DNA Polymerase (5 U/μl) 0.5 μl
10×HG PCR Buffer 1 5 μl
dNTP Mixture (2.5 mM each) 4 μl
*模板 DNA X μl
上游引物(10 μM) 2 μl
下游引物(10 μM) 2 μl
ddH2O Up to 50 ul
*模板 DNA 用量参数(50 μl 反应体系)
100-1000 ng Genomic DNA
5-30 ng Plasmid DNA
1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR 扩增循环参数
循环数 温度 时间
1
st Cycle 95°C 2min
25-35 Cycles
95°C 10s
50~60°C 20s
72°C 2 kb/1min
Last Cycle 72°C 5min
具体程序根据实际扩增情况而定。
3. 电泳:1% 琼脂糖凝胶电泳,上样 5 μl,电泳结束在紫外
灯下检测条带。