Klenow Fragment(exo-)

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Klenow片段（3′→5′ exo-）是DNA聚合酶I的N末端截短物，它保留了DNA聚合酶活性，但5′-3′ 核酸外切酶活性缺失。该酶进一步经点突变（D355A，E357A）去除了其 3′-5′的核酸外切酶活性。因此该DNA聚合酶无任何外切酶活性，仅包含了DNA聚合酶活性，广泛用于标记探针制备、cDNA 条链的合成等建库试验。
包装
组分名称 数量
Klenow Fragment(exo-) (10 U/μl) 100 μl
*10×Klenow Buffer 1 ml
*10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50 mM MgCl2, 10 mM DTT. 该酶兼容PCR Buffer和内切酶Buffer。
单位定义
一个活力单位即在37°C条件下，30分钟内催化10 nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用
用随机引物制备探针
随机引物法标记
cDNA 条链的合成
该酶不能用于产物平端不齐
储存
-20°C可保存3年。
失活
75°C，20min失活。