NCI-H322细胞

用无菌离心管收集瓶子培养基,留作过渡培养

NCI-H322人细胞收到后处理

YS03105B 大鼠解整合素样金属蛋白酶9(ADAM9)Elisa试剂盒
YS03106B 大鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)Elisa试剂盒
YS03107B 大鼠吡啶酚(PYD)Elisa试剂盒
YS03108B 大鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)Elisa试剂盒
YS03109B 大鼠骨碱性磷酸酶(BALP)Elisa试剂盒
YS03110B 大鼠凝聚素(CLU)Elisa试剂盒
YS03111B 大鼠转化生长因子β刺激蛋白22(TSC22)Elisa试剂盒
YS03112B 大鼠白介素32(IL-32)Elisa试剂盒
YS03113B 大鼠孕酮受体(PROGR)Elisa试剂盒
YS03114B 大鼠白介素21(IL-21)Elisa试剂盒
YS03115B 大鼠D-乳酸脱氢酶(D-LDH)Elisa试剂盒
YS03116B 大鼠胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)Elisa试剂盒
YS03117B 大鼠胆固醇(CH)Elisa试剂盒
YS03118B 大鼠甘油三酯(TG)Elisa试剂盒
YS03119B 大鼠(LDL)Elisa试剂盒
YS03120B 大鼠(HDL)Elisa试剂盒
YS03121B 大鼠孕酮受体(PGR)Elisa试剂盒
YS03122B 大鼠紧张素Ⅱ转化酶(ACEⅡ)Elisa试剂盒
YS03123B 大鼠紧张素Ⅰ转化酶(ACEⅠ)Elisa试剂盒
YS03124B 大鼠激素释放激素受体(GnRHR)Elisa试剂盒
YS03125B 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)Elisa试剂盒
YS03126B 大鼠热休克蛋白47(HSP47)Elisa试剂盒
YS03127B 大鼠内源性糖皮质激素(GC)Elisa试剂盒
YS03128B 大鼠柠檬酸合酶(CS)Elisa试剂盒
YS03129B 大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH)Elisa试剂盒
YS03130B 大鼠脂酰辅酶A合成酶(ACS)Elisa试剂盒
YS03131B 大鼠肉毒碱脂酰转移酶(CACT)Elisa试剂盒
YS03132B 大鼠磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)Elisa试剂盒
YS03133B 大鼠金属硫蛋白(MT)Elisa试剂盒
YS03134B 大鼠心肌特异性肌钙蛋白T(cTn-T)Elisa试剂盒
YS03135B 大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)Elisa试剂盒
YS03136B 大鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)Elisa试剂盒
YS03137B 大鼠总胆汁酸(TBA)Elisa试剂盒
YS03138B 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)Elisa试剂盒
YS03139B 大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)Elisa试剂盒
YS03140B 大鼠激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)Elisa试剂盒
YS03141B 大鼠性因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)Elisa试剂盒
YS03142B 大鼠主要碱性蛋白(MBP)Elisa试剂盒
YS03143B 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)Elisa试剂盒
YS03144B 大鼠抑制素结合蛋白(INHBP)Elisa试剂盒
YS03145B 大鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)Elisa试剂盒
YS03146B 大鼠凋亡诱导因子(AIF)Elisa试剂盒
YS03147B 大鼠碱性磷酸酶(ALP)Elisa试剂盒
YS03148B 大鼠生成素4(ANG-4)Elisa试剂盒

培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是运输细胞的 办法。收到细胞用75%酒精喷洒整个细胞瓶,消毒后放到超净台内严格无菌操作,将细胞瓶放入37℃、5%CO2的培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态后再做处理。显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存( 40x,100x,200x各一张),前三天照片是重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好。(传代后建议一瓶用原瓶的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基,以便进行对比培养,换液拧松瓶盖),该细胞的STR鉴定可向客服咨询索取。

NCI-H322人细胞培养步骤

a、细胞传代:如果未超过80%汇合度时,将瓶装的完全培养液收集至离心管中,留5ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;如果细胞密度超80%,即可进行传代培养,

1)对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打细胞,使之完全脱落后吸出,然后将悬液转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL完全培养基重悬。

4. 将细胞悬液按1:2的比例进行分瓶传代(两个T25瓶),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶, 放入到37℃、5%CO2的细胞培养箱中培养。

2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:

方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含8ml完全培养基的新瓶中。

方法二:可选择半换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2比例分到新的含8ml完全培养基新瓶中。

b、细胞冻存:

1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃T25培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入5ml完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心 5min;

3、 弃上清,沉淀细胞加入1ml的雅吉生物无血清冻存液(货号:C7001),混匀后加入冻存管中。

4、 将冻存细胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要将细胞转入液氮罐中,则需在-80℃冰箱 中存放24小时以上再转入液氮罐中。

C、细胞复苏:

1、从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),快速将其置入 37℃水浴中解冻, 直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;

2、将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的15ml离心管中,1000rpm离心5min;

3、弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种至T25培养瓶,放于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养; 天,换用新鲜完全培养基继续培养。

四、注意事项:有些细胞贴壁不牢,在运输过程中发生容易细胞脱落,这是正常现象。可将培养瓶所有培养液收集至离心管,1000rpm离心5min,收集上清作过渡培养(后期对比培养),沉淀加入胰酶1-2ml,轻轻吹打,重悬,消化1-2分钟后,加5ml完全培养基终止反应。再离心,弃上清,加1-2ml完全培养基重悬。然后按1:2比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至5-8ml/瓶, 放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养。

NCI-H322人细胞售后条款:

1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?

1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;

2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;

3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;

4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;

5. 活率问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;

6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。

2)细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?

1. 客户造成细胞污染,不重发;

2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;

3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;

4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;

5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;

6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;

7. 视具体情况而定。

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